為確保淋巴細(xì)胞分離液的有效使用，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和操作人員的安全，以下列出淋巴細(xì)胞分離液的基本操作規(guī)范：

       1、樣本準(zhǔn)備：使用新鮮抗凝全血，抗凝劑可選EDTA、枸櫞酸鈉或肝素。將血液樣本與等體積的生理鹽水或PBS稀釋，以減小紅細(xì)胞凝集，提高分離效果。

       2、分離液使用：將淋巴細(xì)胞分離液恢復(fù)至室溫后，輕輕搖勻。根據(jù)樣本體積，在離心管中加入適量的分離液（通常為樣本體積的1-2倍）。注意，分離液與樣本的總體積不應(yīng)過離心管容量的三分之二。

       3、樣本加樣：使用移液管或巴氏吸管，將稀釋后的血液樣本緩慢加至分離液上層，避免兩者混合，形成清晰的分層界面。

       4、離心操作：在室溫下，以適當(dāng)?shù)碾x心力（如500-1000g）離心20-30分鐘。離心過程中，紅細(xì)胞和粒細(xì)胞會(huì)沉降到底部，淋巴細(xì)胞則聚集在分離液與血漿的界面處，形成一層白膜。

       5、細(xì)胞收集：離心結(jié)束后，小心吸取白膜層至新的離心管中，避免混入紅細(xì)胞和分離液。隨后，用生理鹽水或PBS洗滌細(xì)胞，去除殘留的分離液和血小板。

       6、后續(xù)處理：洗滌后的淋巴細(xì)胞可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)或其他處理。注意在整個(gè)操作過程中保持無菌，避免細(xì)胞污染。